magistrsko delo
Manca Volk (Avtor), Marjanca Starčič Erjavec (Recenzent), Uroš Petrovič (Mentor), Uroš Petrovič (Član komisije za zagovor), Marjanca Starčič Erjavec (Član komisije za zagovor), Rok Kostanjšek (Član komisije za zagovor), Matjaž Peterka (Član komisije za zagovor), Matjaž Peterka (Komentor)

Povzetek

Pridobivanje plazmidnih vektorjev za uporabo v genski terapiji je odvisno od donosnosti pridobivanja, ki mora zagotoviti zadostne količine plazmidne DNA v obliki kovalentno zaprtega kroga. Na količino in kakovost plazmidne DNA v zaključnih procesih vpliva več dejavnikov, ki jih je potrebno optimizirati v začetnih, pripravljalnih fazah bioprocesa. Z namenom povišanja donosnosti bioprocesa smo v sklopu magistrske naloge optimizirali pripravljalni proces. Z gojenjem smo pričeli v 3-litrskem bioreaktorskem sistemu, kjer smo lahko tekom gojenja spremljali rast, parcialni tlak kisika ter pH v kontroliranem okolju. Gojenje smo najprej izvedli v šaržu brez dohranjevanja in kasneje v šaržu z dohranjevanjem. Testirali smo vpliv parcialnega tlaka kisika ter temperature na količino plazmidne DNA. Z uporabo šaržnega gojenja z dohranjevanjem smo dosegli 79,5 % višji donos plazmidne DNA v primerjavi s šaržnim gojenjem brez dohranjevanja.

Ključne besede

plazmidna DNA;genska terapija;pridobivanje plazmidne DNA;optimizacija bioprocesa;

Podatki

Jezik: Slovenski jezik
Leto izida:
Tipologija: 2.09 - Magistrsko delo
Organizacija: UL BF - Biotehniška fakulteta
Založnik: [M. Volk]
UDK: 577.2(043.2)
COBISS: 19055363 Povezava se bo odprla v novem oknu
Št. ogledov: 632
Št. prenosov: 232
Ocena: 0 (0 glasov)
Metapodatki: JSON JSON-RDF JSON-LD TURTLE N-TRIPLES XML RDFA MICRODATA DC-XML DC-RDF RDF

Ostali podatki

Sekundarni jezik: Angleški jezik
Sekundarni naslov: Optimization of production and isolation of plazmid DNA for gene therapy
Sekundarni povzetek: The manufacturing of plasmid vectors for gene therapy applications depends on the yield of plasmid DNA production, which has to be high enough to provide sufficient amount of super coiled plasmid DNA. In the downstream process the amount and quality of plasmid DNA are affected by many factors, which have to be optimised in the upstream process of bioprocess development. The scope of the thesis was to increase the yield of the upstream process. Bacterial cultivation began in a 3 L bioreactor vessel where the growth of bacteria, pH and oxygen partial pressure were monitored in a controlled environment. Bacterial cultivation was carried out a batch mode and also in a fed-batch mode. The effect of oxygen partial pressure and temperature on the production of plasmid DNA was tested. The use of fed-batch mode increased the yield of plasmid DNA by 79.5% compared to batch mode.
Sekundarne ključne besede: plasmid DNA;gene therapy;plasmid DNA production;bioprocess optimisation;
Vrsta dela (COBISS): Magistrsko delo/naloga
Študijski program: 0
Konec prepovedi (OpenAIRE): 1970-01-01
Komentar na gradivo: Univ. Ljubljana, Biotehniška fak.
Strani: X, 37, [1] f.
ID: 11688439