magistrsko delo
Maja Tabor (Avtor), Hrvoje Petković (Recenzent), David Stopar (Mentor), David Stopar (Član komisije za zagovor), Tjaša Danevčič (Član komisije za zagovor), Mojca Narat (Član komisije za zagovor), Hrvoje Petković (Član komisije za zagovor), Tjaša Danevčič (Komentor)

Povzetek

Prodigiozin je rdeči pigment, ki sodi v skupino prodigininov. Zanimiv je, ker deluje protimikrobno, protiglivno, algicidno in proti praživalim. Odkrili so tudi, da ima prodigiozin velik potencial kot protirakasta in imunosupresivna molekula. Protimikrobni mehanizem delovanja prodigiozina je slabo poznan, zato smo v magistrskem delu želeli določiti tarčne celične komponente bakterije B. subtilis, na katere deluje prodigiozin in pri tem povzroči celično smrt. Z dilucijsko metodo v mikrotitrskih ploščah smo različnim sevom Bacillus sp. določili MIK. MIK prodigiozina smo določili tudi bakterijam pri spremembi temperature inkubacije in slanosti v gojišču. Protibakterijsko aktivnost smo določali z merjenjem OD650 bakterijskih kultur v tekočem gojišču LB, kjer smo ob različnih fazah rasti kulturam dodali ustrezno koncentracijo prodigiozina. Hkrati smo celice spremljali tudi z uporabo mikroskopije z diferencialnim interferenčnim kontrastom in merjenjem aktivnosti β – galaktozidaze. V kontrolnih poskusih smo B. subtilis PS-216 tretirali z različnimi bakterolitičnimi in bakteriostatskimi sredstvi. Ugotovili smo, da so bili vsi testirani sevi Bacillus občutljivi na dodatek prodigiozina. Vrednosti MIK so bile različne in so znašale od 2,82 ± 1,81 mg/L pri Bacillus sp. 5A do 7,83 ± 2,86 mg/L pri B. subtilis NCIB 3610. V stresnih pogojih se je občutljivost bakterij na prodigiozin še povečala. Z opazovanjem celic pod mikroskopom in spremljanjem OD650 smo ugotovili, da prodigiozin povzroči avtolizo celic. Največji vpliv ima na hitro deleče se celice v eksponentni fazi rasti. Pokazali smo, da delovanje prodigiozina povzroči večjo prepustnost celične membrane. Iz dobljenih rezultatov sklepamo, da prodigiozin najverjetneje inducira avtolizine, ki povzročijo hitro lizo bakterijske populacije.

Ključne besede

prodigiozin;Bacillus;mehanizem delovanja;protimikrobno sredstvo;liza celic;

Podatki

Jezik: Slovenski jezik
Leto izida:
Tipologija: 2.09 - Magistrsko delo
Organizacija: UL BF - Biotehniška fakulteta
Založnik: [M. Tabor]
UDK: 579.852.11:579.24:604.4:615.33(043.2)
COBISS: 8760185 Povezava se bo odprla v novem oknu
Št. ogledov: 1413
Št. prenosov: 960
Ocena: 0 (0 glasov)
Metapodatki: JSON JSON-RDF JSON-LD TURTLE N-TRIPLES XML RDFA MICRODATA DC-XML DC-RDF RDF

Ostali podatki

Sekundarni jezik: Angleški jezik
Sekundarni naslov: Antibacterial action of prodigiosin on Bacillus genus
Sekundarni povzetek: Prodigiosin is a natural red pigment from a family of prodiginins. It is interesting because of its antibacterial, antifungal, algicidal and antiprotozoal activity. In addition, the anticancer and immunosuppressive properties of prodigiosin were described. The mechanism of prodigiosin's antibacterial action is still unknown. The aim of the study was to determine cellular target components which prodigiosin affects and causes bacterial cell lysis. Minimal inhibitory concentration (MIC) of Bacillus sp. was evaluated by using broth dilution method in microtiter plates. MIC was also evaluated at different incubation temperatures and different medium salinity. The antibacterial activity was evaluated with measuring optical density of bacterial strains in the LB medium at 650 nm, where prodigiosin was added at different cell growth phases. For cell viability evaluation differential interference contrast microscopy was used and cytoplasmic membrane leakage was determined by measuring β – galactosidase activity. As a control, B. subtilis PS-216 was treated with different bacteriolytic and bacteriostatic agents. We have demonstrated, that all tested Bacillus strains are susceptible to prodigiosin. MIC value was between 2,82 ± 1,81 mg/L against Bacillus sp. 5A and 7,83 ± 2,86 mg/L against B. subtilis NCIB 3610. Exposure of bacterial strains to stress caused by temperature fluctuation and NaCl concentraton increased susceptibility to prodigiosin. Microscopy and optical density data indicate that prodigiosin causes celly lysis. The highest impact of prodigiosin was observed on actively dividing cells in the exponental growth phase. We have observed that prodigiosin increases permeability of cytoplasmic membrane. Based on our results, we have proposed that prodigiosin induces autolysins, leading to fast autolysis of bacterial culture.
Sekundarne ključne besede: prodigiosin;mechanism of action;antimicrobial action;cell lysis;
Vrsta dela (COBISS): Magistrsko delo/naloga
Študijski program: 0
Komentar na gradivo: Univ. v Ljubljani, Biotehniška fak., Študij biotehnologije
Strani: XI, 44 f., [17] f. pril.
ID: 10850850