magistrsko delo
Špela Mikec (Avtor), Mojca Narat (Recenzent), Andreja Nataša Kopitar (Mentor), Andreja Nataša Kopitar (Član komisije za zagovor), Polona Jamnik (Član komisije za zagovor), Mojca Narat (Član komisije za zagovor), Metka Filipič (Član komisije za zagovor)

Povzetek

Limbalne epitelijske matične celice (LEMC) se nahajajo v roženičnem limbusu in omogočajo obnovo roženičnega epitelija. Okvara in pomanjkanje teh celic vodi v boleznsko stanje. Eden od načinov zdravljenja pomanjkanja LEMC je s presaditvijo vzgojenega limbalnega tkiva v kulturi. Določali smo imunogenost gojenega roženičnega tkiva iz keratolimbalnih eksplantov kadavrskih roženic do tretje pasaže na plastiki in intaktni amnijski membrani (AM). S pretočno citometrijo smo določali prisotnost dveh podtipov dendritičnih celic (DC), ki smo jih ločili po izražanju naslednjih označevalcev, za plazmacitoidne DC (pDC): CD123+, CD303+, CD11c-, in za mielodine DC (mDC): CD11c+, CD123-. Merili smo tudi izražanje molekule MHC II, kostimulatornih molekul CD80 in CD86 ter aktivacijske molekule CD83. Merili smo še izražanje molekul CK12 in ABCB5. Prve so značilne za populacijo zrelih epitelijskih roženičnih celic, druge pa za pa populacijo LEMC. Za vse parametre smo naredili modele napovedi povprečnih deležev po pasažah. Pri vseh parametrih se je izkazalo, da razlika med rastjo celic na plastiki in na AM za gojenje ni statistično značilna (p>0,05). Z višanjem pasaž smo opazili trend znižanja deleža pDC in mDC, vendar pa vrednosti niso bile statistično značilne. Trdimo lahko, da je padec števila zrelih epitelijskih roženičnih celic iz prve v drugo (p=0,007) in iz druge v tretjo pasažo (p=0,01) statistično značilen. Prav tako je statistično značilen padec LEMC iz prve v drugo pasažo (p=0,02). Glede na rezultate menimo, da je na obeh podlagah smiselno gojiti celice do vključno prve pasaže, tako dobimo tkivo, ki ima zadostno količino epitelijskih roženičnih celic, LEMC in zmanjšan delež mDC in pDC.

Ključne besede

roženica;limbalne epitelijske matične celice;pomanjkanje limbalnih epitelijskih matičnih celic;gojeno limbalno tkivo;eksplantna tehnika;amnijska membrana;

Podatki

Jezik: Slovenski jezik
Leto izida:
Tipologija: 2.09 - Magistrsko delo
Organizacija: UL MF - Medicinska fakulteta
Založnik: [Š. Mikec]
UDK: 602.9:591.81:611.841(043.2)
COBISS: 9047417 Povezava se bo odprla v novem oknu
Št. ogledov: 894
Št. prenosov: 196
Ocena: 0 (0 glasov)
Metapodatki: JSON JSON-RDF JSON-LD TURTLE N-TRIPLES XML RDFA MICRODATA DC-XML DC-RDF RDF

Ostali podatki

Sekundarni jezik: Angleški jezik
Sekundarni naslov: Determining the immunogenicity of cultured limbal tissue
Sekundarni povzetek: Limbal epithelial stem cells (LESCs) are found in the corneal limbus and are important for corneal epithelium renewal. Lack of these cells leads to a limbal stem cell deficiency (LSCD). We determined the immunogenicity of cultivated tissue from keratolimbal explants of cadaveric corneas up to the third passage grown on plastics and on intact amniotic membrane (AM). Flow cytometry was used to determine the presence of two subtypes of dendritic cells (DC), which were determined by measuring the expression of the following markers: for plasmacitoid DC (pDC): CD123+, CD303+, CD11c-, and for myeloid DC (mDC): CD11c+, CD123-. We also measured the expression of MHC II molecule, the CD80 and CD86 costumulatory molecules, and CD83 activation molecule. Populaton of mature epithelial cells was determined by measuring the expression of CK12, and the population of LESC by the expression of ABCB5. Models of forecasts of average percentage by passages were made. The difference between plastics and AM was not statistically significant (p>0.05) for any measured parameter. Increasing passages reduced the percentage of pDC and mDC, but the values were not statistically significant. The average percentage of mature epithelial corneal cells fell from first to second (p=0.007) and from second to third passage (p=0.01). The average percentage of LEMC from the first to the second passage (p=0.02) also dropped. According to our results, it is best to cultivate the cells up to and including the first passage for both substrates, thus obtaining a tissue that has a sufficient amount of epithelial corneal cells, LEMC, and a reduced proportion of mDC and pDC.
Sekundarne ključne besede: cornea;limbal epithelial stem cells;limbal stem cell deficiency;cultured limbal tissue;explant technique;amniotic membrane;
Vrsta dela (COBISS): Magistrsko delo/naloga
Študijski program: 0
Komentar na gradivo: Univ. v Ljubljani, Biotehniška fak., Študij biotehnologije
Strani: IX, 54 f.
ID: 10959403