diplomsko delo
Povzetek
Sistem CRISPR/Cas9 je bakterijski način obrambe proti virusom. V zadnjih letih je postal najbolj uporabljena metoda za spreminjanje genomov. Sistem z enojno vodečo (sgRNA) specifično prepoznava točno določena zaporedja na genomu, kamor se nato veže protein Cas9 z nukleazno aktivnostjo. Zaradi enostavnosti spreminjanja zaporedja sgRNA in s tem tarče v genomu, ima sistem veliko aplikacij na številnih področij, od spreminjanja genoma rastlin za produkcijo terapevtskih proteinov, mikrobne biotehnologije, sintetične biologije, do direktnih kliničnih aplikacij pri ljudeh. Poleg dobro poznanih aplikacij sistema, s katerimi se genom spremeni, pa se je razvilo tudi ogromno drugih aplikacij. Sistem z deaktiviranim proteinom Cas9 se tako danes uporablja tudi za regulacijo prepisovanja genov ali spreminjanje epigenoma. Kljub širokemu spektru obstoječih aplikacij pa obstajajo omejitve, kot so netarčne mutacije ali težave z dostavo, ki zavirajo še širšo uporabo sistema. Pojavilo se je že veliko rešitev za te ovire. V zadnjem času je bilo izdelanih nekaj izboljšanih proteinov Cas9, prav tako pa je bilo razvitih več novih sistemov, s pomočjo katerih bi lahko težave omejili. Poleg tega je zelo pomembno predvideti in kasneje tudi validirati potencialne neželene učinke v obliki netarčnih mutacij.
Ključne besede
biotehnologija;CRISPR/Cas9;genski inženiring;dCas9;
Podatki
Jezik: |
Slovenski jezik |
Leto izida: |
2019 |
Tipologija: |
2.11 - Diplomsko delo |
Organizacija: |
UL BF - Biotehniška fakulteta |
Založnik: |
[M. Kostanjšek] |
UDK: |
601.4:577.21:602.62/.64:602.68(043.2) |
COBISS: |
9234297
|
Št. ogledov: |
827 |
Št. prenosov: |
257 |
Ocena: |
0 (0 glasov) |
Metapodatki: |
|
Ostali podatki
Sekundarni jezik: |
Angleški jezik |
Sekundarni naslov: |
Applications of CRISPR/Cas9 system, current limitations and future outlook |
Sekundarni povzetek: |
CRISPR/Cas9 is a bacterial immune system against invading viruses. Because altering the sgRNA sequence, which binds to the target in the genome is so facile, CRISPR/Cas9 has become a method of choice in the fields such as genetic engineering, microbial biotechnology or synthetic biology. Furthermore, the system has a great potential in clinical applications for correcting disease-causing genes in somatic cells. The potential of CRISPR/Cas9 extends further than gene editing via NHEJ or HDR. Applications of deactivated Cas9 protein with a fused effector domain have seen a surge in popularity in recent years. With them, it is possible to alter gene regulation, cause epigenetic remodeling or visualize certain loci of interest. Although there is a wide range of potential uses of the system, it is currently coping with some limitations. Such limitations are off-target mutations or problems with delivery. Recently, new solutions have emerged for those challenges, such as engineered Cas9 proteins, modifications in sgRNA and some new systems for higher specificity. It is crucial to determine potential off target sites in both in silico and in vivo or in vitro systems. |
Sekundarne ključne besede: |
biotechnology;genetic engineering; |
Vrsta dela (COBISS): |
Diplomsko delo/naloga |
Študijski program: |
0 |
Konec prepovedi (OpenAIRE): |
1970-01-01 |
Komentar na gradivo: |
Univ. v Ljubljani, Biotehniška fak., Študij biotehnologije |
Strani: |
VIII, 22 str. |
ID: |
11149683 |