diplomsko delo
Žan Žnidar (Avtor), Uroš Petrovič (Mentor)

Povzetek

Enodomenska protitelesa (nanotelesa) so v zadnjem desetletju vse bolj priljubljena, zahvaljujoč stabilnosti in enostavni strukturi. Ker sestojé iz zgolj ene polipeptidne verige, jih je možno pravilno zvite pripraviti v bakterijah ali kvasovkah, zato lahko ustvarimo produkcijske sisteme za proizvodnjo, ki so relativno poceni in dostopni. Kvasovka Saccharomyces cerevisiae sodi v skupino varnih organizmov (GRAS), zato so njihovi proteinski produkti široko uporabni – tudi v farmacevtiki. Kvasovke smo transformirali s plazmidom, ki je v vključku vseboval z zapisom za signalni peptid a faktorja spojen zapis za nanotelo proti proteinu bodice virusa SARS CoV 2, inducirali izražanje pod nadzorom inducibilnega promotorja, nato pa iz gojišča izolirali nanotelo. Protein se je uspešno izražal in izločal v gojišče, kar smo ovrednotili s prenosom western. V tej diplomski nalogi smo dokazali, da je predlagani modelni sistem primeren za proizvodnjo izbranega nanotelesa.

Ključne besede

kvasovke;Saccharomyces cerevisiae;proizvodnja proteinov;nanotelesa;sekrecija;diplomska dela;

Podatki

Jezik: Slovenski jezik
Leto izida:
Tipologija: 2.11 - Diplomsko delo
Organizacija: UL FKKT - Fakulteta za kemijo in kemijsko tehnologijo
Založnik: [Ž. Žnidar]
UDK: 577.112:577.27(043.2)
COBISS: 165400835 Povezava se bo odprla v novem oknu
Št. ogledov: 51
Št. prenosov: 11
Ocena: 0 (0 glasov)
Metapodatki: JSON JSON-RDF JSON-LD TURTLE N-TRIPLES XML RDFA MICRODATA DC-XML DC-RDF RDF

Ostali podatki

Sekundarni jezik: Angleški jezik
Sekundarni naslov: Creating a model system for production of nanobodies in yeast Saccharomyces cerevisiae
Sekundarni povzetek: Single-domain antibodies (nanobodies) have gained popularity in the last decade due to their stability and simple structure. Consisting of only one polypeptide chain, they can be synthesized by bacteria or yeasts as recombinant proteins, and still fold correctly. This allows us to create production systems which are relatively cheap and accessible. Yeast Saccharomyces cerevisiae belongs to GRAS organisms, thus allowing their protein products to have a broad range of applications – including in pharmacy. Upon transforming yeast cells with a plasmid containing a gene for a nanobody against the SARS CoV 2 spike protein following a gene for the alpha-factor leader peptide, the production under the control of an inducible promoter was induced, then the nanobody was isolated. Success of protein expression and secretion into the medium was evaluated using Western blot. In this research, we show that the suggested model system is applicable for production of the chosen nanobody.
Sekundarne ključne besede: nanobody;Saccharomyces cerevisiae;secretion;Beljakovine;Protitelesa;Univerzitetna in visokošolska dela;
Vrsta dela (COBISS): Diplomsko delo/naloga
Študijski program: 1000371
Konec prepovedi (OpenAIRE): 1970-01-01
Komentar na gradivo: Univ. v Ljubljani, Fak. za kemijo in kemijsko tehnologijo, UNI Biokemija
Strani: 28 str.
ID: 19888195