magistrsko delo
Romana Dorn (Avtor), Nada Žnidaršič (Recenzent), Mojca Narat (Mentor), Mojca Narat (Član komisije za zagovor), Sabina Vatovec (Član komisije za zagovor), Polona Jamnik (Član komisije za zagovor), Nada Žnidaršič (Član komisije za zagovor), Sabina Vatovec (Komentor)

Povzetek

Celice ovarija kitajskega hrčka se v farmacevtski industriji pogosto uporabljajo za proizvodnjo biofarmacevtskih učinkovin. Del procesa je proizvodnja celičnih bank, kjer se celice pripravi na zamrzovanje in dolgotrajno shranjevanje na ultra nizki temperaturi. Tako shranjene celice so po odtaljevanju v dobrem stanju in ohranjajo lastnosti celične linije. Zaradi tvorbe ledu med procesom zamrzovanja ali odtaljevanja lahko pride do poškodb celic, kar lahko vodi v nižjo viabilnost celic po odtaljevanju. Nastanek poškodb lahko preprečimo z dodatkom krioprotektantov, ki pa so lahko za celice po določenem času izpostavljenosti in koncentraciji toksični. V magistrski nalogi smo testirali različne koncentracije krioprotektanta DMSO, čase izpostavljenosti krioprotektantu pred zamrzovanjem ter temperaturo priprave zamrzovalne suspenzije z namenom optimizacije zamrzovanja. Testirali smo tudi, ali so ti dejavniki vplivali na titer produkta ob koncu bioprocesa z dohranjevanjem. Zaradi izpostavljenosti različnim temperaturam med rokovanjem s kriovialami smo testirali tudi učinke različnih temperatur na nekaterih celičnih linijah, shranjenih pri ultra nizki temperaturi. Ugotovili smo, da celice dosežejo višjo viabilnost, če pripravimo zamrzovalno suspenzijo pri hladnih pogojih. Nizka temperatura omogoča tudi daljši čas izpostavljenost celic krioprotektantu. Učinek različnih temperatur med rokovanjem s kriovialami na dolgotrajno shranjene celice je specifičen za celično linijo.

Ključne besede

celične banke;zamrzovanje;sesalske celice;optimizacija;CHO;kriprotektanti;DMSO;

Podatki

Jezik: Slovenski jezik
Leto izida:
Tipologija: 2.09 - Magistrsko delo
Organizacija: UL BF - Biotehniška fakulteta
Založnik: [R. Dorn]
UDK: 606:62:57.086.13(043.2)
COBISS: 32335619 Povezava se bo odprla v novem oknu
Št. ogledov: 491
Št. prenosov: 87
Ocena: 0 (0 glasov)
Metapodatki: JSON JSON-RDF JSON-LD TURTLE N-TRIPLES XML RDFA MICRODATA DC-XML DC-RDF RDF

Ostali podatki

Sekundarni jezik: Angleški jezik
Sekundarni naslov: Optimization of cryopreservation of chinese hamster ovary cells
Sekundarni povzetek: Chinese hamster ovary cells are often used in a pharmaceutical industry for the production of biopharmaceuticals. Part of the process is cell banking, where the cells are prepared for freezing and long-term storage to maintain the cell line in original form and condition. Ice formation during freezing is causing injuries to the cells, which can result in low viability after thawing. As a prevention we add cryoprotectants, which can be toxic for cells, depending on the concentrations and exposure time. In the work presented, we aimed to optimize the process of cell bank preparation by testing different concentrations of cryoprotectant DMSO, its exposure time of cryoprotectant before freezing and temperature of preparation. We also tested whether these factors affected titer of product at the end of fed batch bioprocess. Because of exposure to different temperatures during handling with cryovials, we also tested the effect of different temperatures on cells stored at ultra-low temperature on several cell lines. We conclude that low temperature during cell bank preparation can result in higher viability and allows longer exposure time to cryoprotectant. Effect of different temperatures during handling of cryovials after long term storage on viabilities after thawing is cell line dependent.
Sekundarne ključne besede: cell banks;cryopreservation;mammalian cells;optimization;cryoprotectants;
Vrsta dela (COBISS): Magistrsko delo/naloga
Študijski program: 0
Konec prepovedi (OpenAIRE): 1970-01-01
Komentar na gradivo: Univ. v Ljubljani, Biotehniška fak., Študij biotehnologije
Strani: X, 54 f., [10] f. pril.
ID: 12058569