Sekundarni povzetek: |
Cilj študije je bil primerjati standardnih osem 100 µs pulzov z alternativnimi oblikami pulzov (in sicer nanosekundnimi in kratkimi visokofrekvenčnimi bipolarnimi (H-FIRE) pulzi) na različnih ravneh pomembnih za aplikacije, ki temeljijo na elektroporaciji (obseg elektrokemijskih reakcij, čas za zaceljenje celične membrane, zmanjšanje preživetja celic in znotrajcelično kopičenje kemoterapevtika po elektrokemoterapiji). Z merjenjem sproščanja kovinskih ionov z elektrod po elektroporaciji smo potrdili hipotezo, da uporaba H-FIRE in nanosekundnih pulzov zmanjšuje elektrokemijske reakcije tudi, ko so parametri električnega polja (amplituda, pavza med pulzi, …) prilagojeni tako, da imajo enak biološki učinek kot daljši monopolarni pulzi. Naše druge hipoteze, da elektroporacija celic z različnimi oblikami pulzov, ki vodijo v primerljivo permeabilizacijo celične membrane, povzroči primerljivo oksidacijo celičnih komponent, nismo mogli niti potrditi niti ovreči, ker se je izkazalo, da Click-iT Lipid Peroxidation Imaging Kit - Alexa Fluor 488 ni ustrezna metoda za merjenje lipidne peroksidacije v prvih urah po elektroporaciji. Naši rezultati kažejo, da so nanosekundni pulzi s primerno izbranimi parametri primerni za uporabo v elektrokemoterapiji s cisplatinom in bleomicinom, saj povzročijo enako zmanjšanje celičnega preživetja kot z uporabo standardnih osmih 100 μs pulzov. Potrdili smo hipotezo, da elektroporacija z nanosekundnimi pulzi poveča količino kemoterapevtika v celici in posledično poveča tudi njegov citotoksični učinek. |